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多糖是由10個(gè)單糖分子縮合組成的一種高分子碳水化合物，是一類分子結(jié)構(gòu)復(fù)雜且龐大的糖類物質(zhì)。熒光可以標(biāo)記(單糖，雙糖，多糖，聚糖，瓊脂糖，寡糖等) ，多糖由于結(jié)構(gòu)比較復(fù)雜，分子量較多，在結(jié)構(gòu)上就具有其他物質(zhì)所不具備的加工特性和流變性質(zhì)。熒光素類染料又包括異硫氰酸熒光素(FITC)、羥基熒光素(FAM)等。這些染料可以與-CHO、-SH、-NH2，等活性基團(tuán)結(jié)合，用于熒光探針檢測(cè)和分析多糖。況且本身缺乏發(fā)色基團(tuán)和熒光基團(tuán)，因此我們針對(duì)熒光標(biāo)記多糖展開技術(shù)性的探究。
一．熒光標(biāo)記殼聚糖

殼聚糖是多糖中的堿性多糖。殼聚糖分子結(jié)構(gòu)中的氨基基團(tuán)比甲殼素分子中的乙酰氨基基團(tuán)反應(yīng)活性更強(qiáng)，使得該多糖具有優(yōu)異的生物學(xué)功能并能進(jìn)行化學(xué)修飾反應(yīng)。以熒光素異硫氰酸酯(FITC)作為標(biāo)記化合物，采用紫外分光光度計(jì)在447nm下檢測(cè)標(biāo)記在殼聚糖上的FITC，通過m(FITC，μg)/m(殼聚糖，g)表征殼聚糖的熒光標(biāo)記效率.考察殼聚糖溶液pH值、濃度、反應(yīng)時(shí)間以及殼聚糖分子量、脫乙酰度對(duì)殼聚糖熒光標(biāo)記反應(yīng)的影響。

二．熒光標(biāo)記海藻酸鈉多糖

海洋生物多糖是從海洋、湖泊生物體內(nèi)分離、純化得到的多糖。比如殼多糖、海藻酸鈉，螺旋藻多糖等。其中的熒光標(biāo)記海藻酸鈉，又名褐藻酸鈉、海帶膠、褐藻膠、藻酸鹽，是由海帶中提取的天然多糖碳水化合物，由于它特殊的結(jié)構(gòu)和良好的生物相容性，具有科研所需的穩(wěn)定性、溶解性、粘性。海藻酸鈉已經(jīng)逐漸作為化學(xué)改性的研究進(jìn)展。

三．熒光標(biāo)記小刺猴頭菌多糖

菌類多糖包括：脂多糖，酵母多糖，豬苓多糖，小刺猴頭菌多糖，黑木耳樹舌多糖和樹舌多糖等，小刺猴頭菌多糖和黑木耳樹舌多糖利用還原性的末端與氨基發(fā)生偶聯(lián)反應(yīng)。通過紫外分光光度計(jì)、酶標(biāo)儀和熒光分光光度計(jì)對(duì)標(biāo)記后的真菌多糖進(jìn)行掃描，并進(jìn)行運(yùn)算，得到該2種菌多糖的熒光物質(zhì)的取代度，分別為0.79%和0.71%。同時(shí)對(duì)標(biāo)記后多糖的體外穩(wěn)定性進(jìn)行研究，結(jié)果表明，小刺猴頭發(fā)酵浸膏多糖標(biāo)記物和黑木耳發(fā)酵浸膏多糖標(biāo)記物在PBS溶液、血漿及尿液中穩(wěn)定性良好。

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